技術(shù)原理
Olink Target 蛋白檢測(cè)借助 Proximity Extension Assay(簡(jiǎn)稱 PEA,中文翻譯為鄰近 延伸分析)技術(shù),依托富魯達(dá) QPCR 平臺(tái)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)檢測(cè)。實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)一對(duì)特異性識(shí)別靶蛋白的 抗體,在抗體末端連接一段核苷酸序列,只有當(dāng)標(biāo)記唯一核酸序列信息的雙抗體正確識(shí)別靶 蛋白,抗體對(duì)攜帶的核苷酸才能進(jìn)行堿基互補(bǔ)配對(duì)形成雙鏈,從而進(jìn)行后續(xù) PCR 擴(kuò)增與 QPCR 檢測(cè),實(shí)現(xiàn)將靶蛋白的定量檢測(cè)轉(zhuǎn)化成寡聚核苷酸的實(shí)時(shí)定量檢測(cè)。
實(shí)驗(yàn)環(huán)節(jié)
Olink 實(shí)驗(yàn)檢測(cè)主要分為 3 大步驟:孵育、延申、檢測(cè)。在孵育階段,特異性的抗體對(duì) 會(huì)識(shí)別對(duì)應(yīng)的靶蛋白并進(jìn)行結(jié)合,同時(shí)末端的堿基序列會(huì)進(jìn)行互補(bǔ)配對(duì);延伸階段主要是進(jìn) 行 DNA 片段的擴(kuò)增富集;在檢測(cè)階段,以富集的 DNA 片段為模板進(jìn)行 QPCR 檢測(cè),并收集檢 測(cè)數(shù)據(jù)(QPCR 數(shù)據(jù))。
技術(shù)優(yōu)勢(shì)
無(wú)與倫比的靈敏度與特異性: 突破低豐度蛋白檢測(cè)瓶頸,提供可靠數(shù)據(jù)。
多重檢測(cè)能力: 單一樣本,一次實(shí)驗(yàn),獲取海量蛋白信息。
超低樣本量: 珍貴臨床樣本(尤其是縱向研究或小動(dòng)物模型)的理想選擇。
高數(shù)據(jù)質(zhì)量與重現(xiàn)性: 嚴(yán)格的QC和標(biāo)準(zhǔn)化流程,確保結(jié)果可靠,適合多中心合作。
廣泛的生物學(xué)覆蓋: 從大規(guī)模探索到精確定靶,覆蓋各種研究階段。
強(qiáng)大的數(shù)據(jù)分析和解讀支持: 提供Olink Insight云平臺(tái)進(jìn)行數(shù)據(jù)可視化和基礎(chǔ)分析。
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